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Protein G Crystarose FF(Affinity Chromatography Resin)
classification:Antibody purification packing
类似Protein G Crystarose 4FF是偶联蛋白G配基的亲和层析凝胶介质,对鼠源有比较强的亲和力(不同种属亲和力强弱见下表),使用范围广,可以用来纯化大多数多克隆抗体
Protein G Crystarose FF
说明:
类似Protein G Crystarose 4FF是偶联蛋白G配基的亲和层析凝胶介质,对鼠源有比较强的亲和力(不同种属亲和力强弱见下表),使用范围广,可以用来纯化大多数多克隆抗体,也可以单克隆抗体。除此之外,Protein G可以和Fab有轻微的结合,可以用来纯化Fab片段。我公司生产的该类凝胶介质具有载量高,流速快,使用寿命长的特点。
参数:

三、操作方法:
1、溶液配制:
Buffer A: 10mM 磷酸盐缓冲溶液+140 mM NaCl,PH7--7.4
Buffer B: 5mM柠檬酸+150mM 氯化钠
定溶至1升去离子水中,搅拌溶解,0.45um滤膜过滤备用。
2、 吸附和洗涤缓冲液
用Buffer A平衡层析柱,调节样品的溶液的PH值和BufferA相同后低流速进样。进样完后,直接用Buffer B溶液洗脱,洗脱前在试管中预先加入一定量的Na2HPO或者1M Tris用来中和洗脱液的PH值。
四、应用举例
A 实验名称:CHO细胞培养上清抗体的纯化
1、 重组蛋白G 琼脂糖凝胶装柱,柱床体积为5ml,流尽20%乙醇溶液;
2、用Buffer A平衡5-10个床体积,流速为5ml/min(直径2.6cm层析柱,高5cm);
3、 将100ml培养上清用0.45um滤膜过滤,上样。流速为3ml/min;
4、 用Buffer A冲洗5-10 个床体积,流速为5ml/min;
5、 在洗脱试管中加入12%洗脱体积的0.2M Na2HPO4溶液。
6、 用约3--5个体积的Buffer B洗脱,用洗脱试管收集。
7、 用纯水流洗柱子10个柱床体积,再用20%的乙醇流洗10 个柱床体积,流速为5ml/min
8、 柱子置于+4~8℃环境中保存。
五、适用范围
Protein A和Protein G的相对结合强度

++++ =强结合,++ =中等结合,- =弱或不结
Key words: